標(biāo)準(zhǔn)血紅蛋白參考液：在溶血液中,血紅蛋白(硫化血紅蛋白除外)中亞鐵離子(Fe2+)被高鐵氰-化鉀氧化成高鐵離子(Fe3+),血紅蛋白轉(zhuǎn)化成高鐵血紅蛋白。高鐵血紅蛋白同氰-化鉀中的氰離子反應(yīng)生成氰化高鐵血紅蛋白。氰化高鐵血紅蛋白在波長(zhǎng)540mm左右有一個(gè)較寬的吸收峰,它在540nm處的吸光度同它在溶液中的濃度成正比。標(biāo)本中血紅蛋白的濃度可通過先測(cè)得吸光度,然后從標(biāo)準(zhǔn)曲線上按吸光度讀取。

[操作方法]

1.光電比色計(jì)標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制法:

1.1標(biāo)準(zhǔn)液每套四支,其濃度分別為50gHb/L、100gHb/L、150gHb/L、200gHb/L

血液。

1.2用50倍稀釋后的文齊氏液或蒸餾水作空白管，在540nm波長(zhǎng)處用分光光度計(jì)或綠色濾光片的光電比色計(jì)進(jìn)行測(cè)量，調(diào)吸光度（A值）為“0"，再測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)液管，每管測(cè)量3次吸光度（A值），取均值。縱坐標(biāo)為吸光度（A值），橫坐標(biāo)為Hb克數(shù)（g Hb/L血液），在標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.3用標(biāo)定過的吸管準(zhǔn)確吸取20μl血液，放入盛有5ml文齊氏液的試管中吸洗三次混勻（251倍稀釋），5分鐘后在同一比色計(jì)上測(cè)定血樣品管的吸光度值（A值），從標(biāo)準(zhǔn)曲線查出A值相對(duì)應(yīng)血樣品的血紅蛋白克數(shù)（g Hb/L）。

2. 血紅蛋白計(jì)的校正法:

2.1 用50倍稀釋后的文齊氏液或蒸餾水作空白管，將血紅蛋白計(jì)的讀數(shù)調(diào)為“0"值。

2.2 取出空白管，換上單濃度血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)管（100gHb/L、130gHb/L、

150gHb/L），旋轉(zhuǎn)按鈕使血紅蛋白計(jì)的讀數(shù)與標(biāo)準(zhǔn)管克數(shù)一致。按1.3項(xiàng)方法制備血樣品管并混勻，5分鐘后在同一血紅蛋白計(jì)上測(cè)定，顯示克數(shù)為該血樣品的實(shí)際克數(shù)（g Hb/L）。

標(biāo)準(zhǔn)血紅蛋白參考液