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  HEPES (4-(2-羥乙基)-1-派嗪乙磺酸) 是一種兩性離子有機(jī)化學(xué)緩沖劑，對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性作用。它是一種氫離子緩沖劑，能較長(zhǎng)時(shí)間控制恒定的pH范圍。使用終濃度為10-50mmol/L，一般培養(yǎng)液內(nèi)含20mmol/LHEPES即可達(dá)到緩沖能力。

  好的緩沖液”如HEPES具有以下特征： 
 

• pKa 值介于 6.0 和 8.0 之間
• 高溶解度
• 膜不透性
• 對(duì)生化反應(yīng)影響有限
• 極低的可見(jiàn)光和紫外光吸收
• 耐化學(xué)作用和酶解作用
• 易于制備。

  HEPES廣泛應(yīng)用于多種生物化學(xué)反應(yīng)，并在某些細(xì)胞培養(yǎng)基中用作緩沖試劑.

   碳酸氫鹽是常用的培養(yǎng)基緩沖系統(tǒng)。 這是由于碳酸氫鹽對(duì)細(xì)胞具有營(yíng)養(yǎng)作用的優(yōu)勢(shì)，盡管在生理 pH 下，其緩沖能力會(huì)有所降低。 加入HEPES，在pH 7.2至7.6下為細(xì)胞培養(yǎng)基提供了其它緩沖系統(tǒng)。 

   細(xì)胞培養(yǎng)基中的HEPES濃度范圍為10 mM至25 mM。  

   HEPES 不為細(xì)胞供給營(yíng)養(yǎng)。 只有在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需要長(zhǎng)時(shí)間在 CO ₂ 培養(yǎng)箱外處理細(xì)胞時(shí)，才將其加入培養(yǎng)基，增強(qiáng)緩沖能力。

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