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人高遷移率族蛋白B1elisa試劑盒使用說明書
更新時間:2017-05-30   點(diǎn)擊次數(shù):1470次

人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)elisa試劑盒簡介

高遷移率族蛋白B1([1]  ,HMGB1)是一種高度保守的核蛋白,廣泛分布于哺乳動物細(xì)胞。隨著其晚期促炎作用的發(fā)現(xiàn),HMGB1成為近年來危重醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。本文就其家族分類、基因和蛋白結(jié)構(gòu)、細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng)方究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

中文名 高遷移率族蛋白B1 外文名 high mobility group protein 簡    稱 HMGB1 類    別 核蛋白 發(fā)現(xiàn)者 Johns 發(fā)現(xiàn)時間 20世紀(jì)60年代 分布地區(qū) 哺乳動物細(xì)胞

人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)elisa試劑盒使用說明書

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。

2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。

3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。

4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。

5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml

6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

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