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大鼠腎素(PRA)elisa試劑盒簡介

    群體反應性抗體（panel reactive antibodies,PRA）是指大鼠腎素，是各種組織器官移植術前篩選致敏受者的重要指標，與移植排斥反應和存活率密切相關。腎素（renin）是腎小球旁器（也稱球旁復合體）的球旁細胞釋放的一種蛋白水解酶。腎素、血管緊張素、醛固酮三者是一個相連的作用系統(tǒng)，稱為腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)。腎素釋放受多方面因素的調節(jié)，當動脈血壓降低，循環(huán)血量減少時，交感神經(jīng)興奮，致密斑感受器興奮，入球小動脈的血壓和血流量均減少，對入球小動脈的牽張刺激減弱，激活了管壁的牽張感受器，促進球旁細胞釋放腎素。同時，腎小球濾過率隨腎血流量減少而減少，流過致密斑的鈉離子濃度減少，致密斑被激活，轉而促進球旁細胞釋放腎素。球旁細胞受交感神經(jīng)支配，交感神經(jīng)興奮，增加腎素釋放。

信帆生物產(chǎn)品大鼠腎素(PRA)elisa試劑盒樣本處理注意事項

    收集標本前都必須有一個計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標本盡早檢測，對收集后當天就進行檢測的標本，及時儲存在4℃?zhèn)溆?，如有特殊原因需要周期收集標本，請造模取材后，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差，蛋白極易降解，直接影響實驗質量，所以避免反復凍融。

具體樣本的處理和要求如下：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。

2. 血漿：應根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入 10 ％（ v/v ）抗凝劑( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分鐘后，離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉 / 分）。仔細收集上清。如有沉淀形 成，應再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

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